Whakawhitinga pūngao resonance resonance (FRET)
Ko te whakawhitinga o te hiko whakangao o te Fluorescence Resonance (FRET) he tukanga whakawhiti hiko kore-radiative e whakawhitihia ai te kaha o te ahua hihiko o te kaituku ki te ahua hihiko o te kaikawe na roto i te taunekeneke a nga tokorua hiko i waenga i nga tokorua.Ko tenei tukanga kaore e uru ki nga whakaahua, na reira he kore-radiative.Ko tenei whakamatautau he pai ake te tere, te tairongo me te ngawari.
Ko te waikano i whakamahia ki te whakamatautau FRET he rite tonu.Engari i roto i te nuinga o nga tono, ka whakamahia nga tae rereke.I te poto, ko te whakawhiti i te hiko whakarorohiko marama ko te whakawhiti i nga rua o nga dipoles mai i te kaituku (waikano 1) ki te kaiwhiwhi (waikano 2) i te wa e hikaka ana te roopu kaituku.I roto i te nuinga o te waa, ka inaki te tuāwhiorangi tuku o te roopu fluorophore Donor ki te tuāwhiorangi whakauru o te roopu Acceptor."I te wa e tika ana te tawhiti i waenga i nga fluorophores e rua (10 — 100 A), ka taea te kite i te whakawhitinga o te hiko fluorophore mai i te kaituku ki te kaikawe."Ko te tikanga o te whakawhiti hiko e whakawhirinaki ana ki te hanganga matū o te kaiwhakawhiwhi:
1. Ka huri ki te wiri ngota, ara, ka ngaro te marama kanapa o te whakawhiti hiko.(Ko te kaikawe he tiihi marama)
2. He kaha ake te paheketanga i te kaitaunaki ake, ka puta he huringa whero i roto i te tuāwhiorangi korikori tuarua.(Ko nga kaiwhiwhi he kaiwhakamarama marama).
Ko te roopu kaituku (EDANS) me te ira kaiawhina (DABCYL) e hono rite ana ki te tïpako taiao o te HIV protease, a ki te kore te tïpako e momotuhia, ka taea e DABCYL te tinei i te EDANS ka mutu ka kore e kitea ki te fluorine.I te momotutanga o te protease HIV-1, kua kore te EDANS e tineia e te DABCYL, a ka kitea nga luciferases EDANS.Ko te waatea o nga aukati protease ka taea te aro turuki i nga huringa o te kaha o te rere o te EDANS.
Ko nga peptides FRET he taputapu watea ki te ako i te korenga o te peptidase.I te mea ka taea te aro turuki tonu i tana tukanga tauhohenga, he huarahi watea mo te kite i te mahi o te enzyme.Ko te kanapa i puta mai i muri i te whakamaaramatanga o nga here peptide e te kaituku / kaikawe e whakarato ana i te inenga o te mahi enzyme i nga kuhanga nanomolar.I te wa e mau tonu ana te peptide FRET, ka kitea te ngaro ohorere o te uira o roto, engari ka pakaru tetahi here peptide i te taha o te kaituku / kaikawe, ka puta he uira, ka kitea tonu ka taea te ine i te mahi enzyme.
Wā tuku: Akuhata-14-2023