I roto i te rangahau koiora, ka whakamahia nga polypeptides me te raupapa roa.Mo nga peptides neke atu i te 60 nga waikawa amino i roto i te raupapa, ka whakamahia te whakaaturanga ira me te SDS-PAGE ki te tiki.Engari, he roa te wa o tenei tikanga, a, kaore i te pai te painga o te wehenga o te hua whakamutunga.
Nga wero me nga otinga mo te whakahiato peptide roa
I roto i te whakahiatotanga o nga peptides roa, kei te raru tonu tatou, ara, ka piki ake te aukati steric o te tauhohenga condensation ki te pikinga o te raupapa i roto i te whakahiato, me te wa tauhohenga me whakatika kia oti ai te tauhohenga.Engari, ka roa ake te wa tauhohenga, ka nui ake nga paanga o te taha ka puta, ka puta mai he wahanga o te peptide whainga.Ko enei toenga - ko nga mekameka peptide ngoikore he poke matua i puta mai i te whakahiato peptide roa.Na reira, i roto i te whakahiatotanga o te peptide roa, ko te raru nui me hinga tatou ko te torotoro i nga tikanga tauhohenga o te kounga teitei me nga tikanga tauhohenga, kia pai ake ai te whanui me te ki tonu o te tauhohenga waikawa amino condensation.I tua atu, whakaitihia te wa tauhohenga, na te mea ka roa ake te wa tauhohenga, ka nui ake nga tauhohenga o te taha e kore e taea te whakahaere, ka nui ake te uaua o nga hua.No reira, ka whakarapopototia nga wahanga e toru e whai ake nei:
Ka taea te whakamahi i te waihanga ngaruiti: Mo etahi waikawa amino ka kitea i roto i te tukanga whakahiato kaore i te ngawari ki te whakauru, ka taea te whakamahi i te miihini ngaruiti.He mea whakamiharo nga hua o tenei tikanga, me te tino whakaiti i te wa tauhohenga, me te whakaiti i te hanganga o nga hua-hua matua e rua.
Ka taea te whakamahi tikanga whakahiato kongakonga: Ina he uaua etahi peptides ki te whakahiatohia e nga tikanga whakahiato noa me te kore e ngawari ki te pure, ka taea e tatou te tango i te katoa o te toha o etahi waikawa amino i roto i tetahi waahanga o te peptide ki te mekameka peptide katoa.Ka taea hoki e tenei tikanga te whakaoti rapanga maha i roto i te whakahiato.
Ka taea te whakamahi Acylhydrazide synthesis: acylhydrazide synthesis of peptides he tikanga mo te whakahiato-waahanga o te N-terminal Cys peptide me te C-terminal polypeptide hydrazide matū tauhohenga whiriwhiri i waenga i te hanganga o nga here amide ki te whakatutuki i te tikanga here peptide.I runga i te tuunga o Cys i roto i te mekameka peptide, ka wehewehea e tenei tikanga te mekameka peptide katoa ki nga raupapa maha me te whakahiato i a raatau.Ka mutu, ka whiwhihia te peptide whainga na roto i te tauhohenga wai-waahanga.Ko tenei tikanga kaore i te whakaiti noa i te wa whakahiato o te peptide roa, engari ka tino whakanui ake i te ma o te hua whakamutunga.
Pure peptide roa
Ko te motuhake o nga peptides roa e kore e taea te arahi ki nga waahanga uaua o nga peptides masivesivá.No reira, he wero hoki ki te pure i nga peptides roa na HPLC.raupapa amyloid o te tukanga purenga polypeptide, he maha nga wheako me te whakamahi pai i roto i te purenga o te peptide roa.Na roto i te tango i nga taputapu hou, te whakakotahitanga o nga punaha purenga maha, te wehewehenga me etahi atu tikanga wheako, i tino pai ake te angitu o te purenga peptide roa.
Te wa tuku: Apr-18-2023